轉自“中國體外診斷網 CAIVD”

PD-L1抗體試劑的審評挑戰(zhàn)

免疫治療自2013年被評為“突破性療法”以來，美國、歐洲、日本等國家已批準了多個用于不同癌種的PD-1/PD-L1免疫藥物，我國也于近期批準上市了PD-1免疫藥物。隨著PD-1/PD-L1免疫藥物的廣泛使用，如何應用免疫標志物選擇合適的治療人群成為免疫治療面臨的主要挑戰(zhàn)之一。

多項大型臨床研究顯示，在腫瘤患者中，PD-1/PD-L1抑制劑治療的獲益程度與腫瘤患者PD-L1表達存在相關性。通過免疫組織化學的方法檢測腫瘤患者的PD-L1表達是目前公認的有效的方法。對腫瘤患者的PD-L1表達水平進行檢測，可以鑒別出哪些腫瘤患者適合使用PD-1/PD-L1抑制劑進行治療。

目前世界各國針對PD-1/PD-L1抑制劑開發(fā)了多個基于免疫組織化學方法的檢測試劑，用于評估PD-L1的表達情況，包含不同的抗體、克隆、平臺、評分系統(tǒng)和臨界值設定，分別作為各自藥物的伴隨診斷試劑。但4種PD-1/PD-L1抑制劑臨床研究中應用的檢測抗體（克隆號分別為28-8、22C3、SP142、SP263）均未在我國獲得上市批準。目前，克隆號為SP263、SP142和22C3的抗體試劑在我國已進入注冊申請過程，其中部分申報產品進入優(yōu)先審查程序。

PD-L1抗體試劑的審評難點集中在臨床試驗部分。首先，PD-L1抗體試劑的判讀方式與一般輔助診斷用途的免疫組織化學抗體試劑有所不同。PD-L1的表達情況是通過計算任何染色強度下腫瘤細胞和/或免疫細胞染色的百分比予以評定。然而，不同克隆的PD-L1表達判讀標準以及閾值設定并不相同，陽性染色位置設定亦不相同，造成了PD-1/PD-L1抑制劑研究結果無法互相通用或橫向比較。如何選擇一致性研究中的對比試劑及合理進行平行判讀結果的比較，是審評過程中需要考慮的問題。

另外，目前國內多家單中心初步研究數(shù)據(jù)顯示，我國肺癌患者的PD-L1表達與國外研究稍有不同，不同病理類型癌種的PD-L1表達情況與國外存在差異。因此，在伴隨診斷臨床意義的驗證中，如何合理接受境外臨床試驗數(shù)據(jù)也是審評過程中的挑戰(zhàn)。

關于人類Brca1/2基因突變檢測試劑注冊審評概述

一、Brca1基因和Brca2基因概述

Brca1基因和Brca2基因都是常染色體顯性遺傳的腫瘤抑制基因，參與DNA的損傷修復和轉錄調控。研究表明，Brca1/2基因突變的腫瘤細胞對PARP抑制劑的敏感性顯著高于正常細胞，通過抑制PARP-1的活性可使Brca1/2基因突變的腫瘤細胞發(fā)生合成致死。修飾酶PARP-1（Ⅰ型多聚ADP-核糖聚合酶，poly(ADP-ribose) polymerase 1）在DNA損傷修復和細胞凋亡中發(fā)揮重要作用，Brca1基因和Brca2基因發(fā)生突變的腫瘤細胞往往依賴PARP-1完成對DNA損傷的修復，因此PARP抑制劑通過抑制PARP-1的功能可靶向殺傷Brca1/2基因突變的腫瘤細胞。臨床研究表明，Brca1基因或Brca2基因突變的卵巢癌和乳腺癌患者可以從PARP抑制劑奧拉帕尼和Rubraca等治療中獲益。

目前美國食品與藥物管理局（FDA）和歐洲藥品管理局（EMA）等已批準PARP抑制劑用于治療Brca1基因或Brca2基因突變的卵巢癌患者。奧拉帕尼治療乳腺癌的臨床Ⅲ期研究于2017年宣布成功結束，達到臨床設計的首要終點目標，結果顯示可顯著延長患者無進展生存期，2018年12月美國FDA批準奧拉帕尼用于攜帶Brca突變陽性的晚期卵巢癌患者一線含鉑化療完全或部分緩解患者的維持治療。該藥已于2018年8月在中國批準上市。

二、Brca1基因和Brca2基因檢測試劑及審評難點

美國FDA陸續(xù)批準了Brca1/2突變基因檢測產品上市。該類產品其共同特點是由美國FDA指定該類產品在單一檢測地點進行檢測。而目前國內部分專家并不完全認同該模式，認為國內臨床機構的檢測和判讀能力不低于企業(yè)的檢測和判讀能力，且中美醫(yī)療環(huán)境及該類產品實際臨床檢測應用發(fā)展存在差異。部分臨床機構配備相關人員，具有較強的檢測和解讀能力，但因Brca檢測業(yè)務在中國開展較晚，只少數(shù)醫(yī)院能夠滿足上述條件。部分臨床機構目前不具備相關檢測能力和/或解讀能力，質量難以評價和控制。

開展基于NGS測序原理的Brca檢測需要配備NGS實驗室及相關試驗人員及生物信息解讀人員等，目前歐洲分子基因診斷質量聯(lián)盟(European Molecular Genetics Quality Network,EMQN)和國家衛(wèi)生和計劃生育委員會病理質控評價中心(PQCC)會對Brca每年進行室間質評，國內部分檢驗機構也進行過Brca項目的室間質評。但目前對于NGS實驗室還沒有有效的體系規(guī)范和考核，對解讀人員資質的認可也缺乏有效手段。

國內目前沒有公認的人類遺傳病數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)對比主要依靠國外數(shù)據(jù)。如何讓申請人的軟件接入的數(shù)據(jù)庫充分且合理，以及如果國內出現(xiàn)數(shù)據(jù)庫，什么樣的數(shù)據(jù)庫是可接受的等問題，都是需要進一步探索的問題。

三、小結

通過前期調研和討論，我部門認為該類產品的檢測應用機構能力非常重要、檢測結果解讀較為復雜，以及目前中國人群遺傳信息數(shù)據(jù)缺乏等問題，需要在其申請上市時對應用檢測地點、產品質量、結果解讀、產品監(jiān)管等方面加強考慮。 

考慮到該類產品有重要的臨床意義，為了保障檢測質量和結果解讀的能力。在技術審評過程中，我們將考慮結合產品將其應用范圍限制在一定檢測范圍內。如申請人相關的檢測中心及一定范圍內的臨床機構。

Brca檢測應用中，Brca遺傳信息數(shù)據(jù)庫是結果判斷的重要依據(jù)。理想的遺傳性疾病數(shù)據(jù)庫應該做到公開、可溯源、不可篡改數(shù)據(jù)、符合倫理要求、有專人或團隊負責數(shù)據(jù)的更新和維護等。鼓勵國內大的遺傳數(shù)據(jù)庫按照上述原則進行建設，并逐步建立國內中國人群數(shù)據(jù)庫。

綜上，我們將積極探索我國該類產品的審評模式和上市相關問題。

包蟲病臨床診斷及病原體相關游離DNA（cfDNA）簡介

一、包蟲病簡介

包蟲病又名棘球蚴病，是一種古老的人畜共患性寄生蟲病，主要由人感染棘球絳蟲的幼蟲所致。該疾病分為囊型包蟲病和泡型包蟲病兩種，分別由細粒棘球蚴和多房棘球蚴感染引起。兩種絳蟲都必須在哺乳類動物體內寄生才能完成生活史，細粒棘球絳蟲的終末宿主一般為犬和狼；多房棘球絳蟲的終末宿主一般為狐貍、犬和狼。

近年來，包蟲病呈全球性分布，我國包蟲病主要流行于西北牧區(qū)和半農半牧地區(qū)，其中以新疆、西藏、寧夏、甘肅、青海、內蒙古、四川7省最為嚴重。根據(jù)文獻報道，我國西部人群包蟲病的感染率為3.1%～ 31.5%，患病率為0.5%～5.0%，其中青藏高原部分地區(qū)人群患病率為5.0％～10.0％。據(jù)2010年原國家衛(wèi)生和計劃生育委員會“防治包蟲病行動計劃(2010—2015)”，我國西部地區(qū)包蟲病平均患病率為1.08％，受威脅人口約為6600萬，每年造成直接經濟損失30億元。

二、包蟲病診斷依據(jù)

根據(jù)現(xiàn)行包蟲病診斷標準，包蟲病的臨床診斷要綜合考慮：流行病學史、臨床表現(xiàn)、影像學檢查、實驗室檢查及病原學檢查幾個方面。

1.流行病學史

該部分主要考慮患者是否有在流行區(qū)的居住、工作、旅游或狩獵史，或與犬、牛、羊等家養(yǎng)動物或狐、狼等野生動物及其皮毛的接觸史；在非流行區(qū)有從事來自流行區(qū)的家畜運輸、宰殺、畜產品及皮毛加工等暴露史。

2.臨床表現(xiàn)

患者主要的臨床表現(xiàn)為棘球蚴的囊占位所致的壓迫、刺激、囊破裂引起的一系列癥狀，囊性包蟲病可發(fā)病全身多個器官，以肝、肺為常見；泡型包蟲病原發(fā)病灶幾乎都位于肝臟。

3.影像學檢查

主要為通過B超掃描、X線檢查、計算機斷層掃描或磁共振檢查發(fā)現(xiàn)占位性病變。

4.實驗室檢查

通過酶聯(lián)免疫吸附試驗、間接紅細胞吸附試驗、PVC膜快速ELISA、免疫印跡技術等方法對包蟲病相關的特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復合物進行檢測。

5.病原學檢查

在手術活檢材料、切除的病灶或排出物中發(fā)現(xiàn)棘球蚴的囊壁、子囊、原頭節(jié)或頭鉤。此為包蟲病的確診方法。

三、相關檢測產品介紹

對來源于患者或疑似患者人體樣本中的包蟲病感染相關生物標志物進行檢測是輔助診斷包蟲病的重要手段。相關生物標志物包括特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復合物、病原體核酸等。我國已批準四個包蟲病抗體檢測試劑，產品信息見表1，已批準產品均采用免疫學方法對樣本中的病原體抗體進行檢測，免疫學檢測有其自身的局限性，一方面，由于細粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體自身抗原存在交叉的特點，導致應用抗體檢測來區(qū)分囊型/泡型效果欠佳；另一方面，抗體檢測無法區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。隨著檢測技術的進步，病原體核酸及其游離DNA（cfDNA）檢測為感染的輔助診斷提供新的思路。目前，國際上尚無包蟲病核酸檢測相關的產品，我國已有細粒棘球蚴和多房棘球蚴核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）產品獲批進入國家藥監(jiān)局創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審查程序，該產品臨床應用的安全有效性仍然在驗證過程中。

表1 我國已批準的包蟲病檢測試劑

四、病原體相關游離DNA（cfDNA）簡介

近年來，隨著對寄生蟲血漿游離DNA（cfDNA）的研究，cfDNA在寄生蟲病的檢測中得到了快速發(fā)展，目前已有應用cfDNA檢測對瘧原蟲、弓形蟲、利士曼原蟲、錐蟲、血吸蟲等寄生蟲感染進行輔助診斷的報道。針對寄生蟲感染后cfDNA的來源，可能是蟲體或蟲卵的細胞或碎片在增生、成熟、脫落、腐爛、崩解等過程中主動分泌或被動釋放出內部的DNA進入宿主體液循環(huán)系統(tǒng)產生；也有研究表明絳蟲主動分泌的外泌體是寄生蟲感染后患者體內出現(xiàn)蟲源DNA的重要原因。基于上述研究，檢測樣本中細粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體游離DNA為該疾病的輔助診斷提供了理論基礎。

五、檢測游離DNA的考量

寄生蟲源cfDNA的檢測在臨床應用中存在一定優(yōu)勢，一方面，可根據(jù)特異性的基因序列對兩種不同種類的病原體進行分型，從而達到對疾病進行分型的目的；另一方面，患者樣本中存在寄生蟲DNA在一定程度上可提示患者可能感染相關病原體。然而，作為一個新的標志物，能夠應用于臨床，在現(xiàn)有的理論基礎上，還應進一步研究。一是，應進一步明確患者不同疾病進展階段血漿游離DNA濃度的變化，并以此為基礎，確定該標志的臨床預期用途（如：疾病早篩、輔助診斷、鑒別診斷及治療監(jiān)測等）；二是，應依據(jù)標志物擬定的預期用途，進一步對該標志物進行臨床驗證，臨床研究應考慮入組人群、對照方法等，如該標志用于疾病的鑒別診斷，則入組人群應為包蟲病疑似人群，其中不同大小占位性病變病例、不同病灶退變（CE4、CE5）病例、不同基因型病例等均應入組，此外還應考慮非包蟲病病例的干擾。用于疾病鑒別診斷用途的臨床研究其對照方法應為疾病確診的標準即病原學檢查。

六、總結

我國包蟲病防控形勢嚴峻，包蟲病流行區(qū)多為相對偏遠、落后的地區(qū)，目前包蟲病的診斷很大程度上依賴于影像學和病原學，這不僅對臨床醫(yī)生專業(yè)技術水平要求較高，還存在一定程度的誤診、漏診的風險。血漿游離cfDNA檢測操作較為簡便，結果易于解讀，如能按預期應用于臨床，將對包蟲病的診斷起到積極作用。

乙型肝炎病毒耐藥基因檢測概述

一、乙型肝炎病毒耐藥基因檢測的臨床意義

WHO相關資料顯示，全球感染過乙型肝炎病毒（HBV）的患者超過三分之一，而慢性乙型肝炎患者約有2.4億，乙肝嚴重影響著人類的生命健康。HBV是傳染性疾病乙型病毒性肝炎的主要病因，感染HBV可引起肝硬化甚至肝細胞癌變。HBV屬嗜肝DNA病毒科，為雙鏈DNA病毒，容易發(fā)生變異，從而形成不同的基因型。目前已根據(jù)HBV核苷酸序列異質性≥8%將其分成A-J 10種基因型。在我國北方以C型為主，南方以B型為主，新疆有出現(xiàn)D型。作為常規(guī)抗病毒治療的核苷（酸）類似藥物，拉米夫定(LAM)和阿德福韋酯(ADV)等能夠有效抑制HBV的復制，然而長期使用會導致耐藥的發(fā)生，使治療效果明顯下降。隨著分子生物學的快速發(fā)展，越來越多的分子生物學技術用于HBV的基因分析，從而為乙肝患者的抗病毒治療提供科學的依據(jù)。盡早檢測HBV變異，準確判斷拉米夫定和阿德福韋酯等治療后耐藥，指導個性化用藥，對于提高乙肝治療成功率具有很重要的價值。

二、乙型肝炎病毒耐藥機制以及常見的突變基因位點

HBV基因型耐藥是指乙肝病毒出現(xiàn)某種特定的突變，這些特定的突變點導致HBV耐藥。其分子機制是：HBV是一種變異較高的病毒，在復制過程必須經過RNA中間體的逆轉錄復制步驟，但RNA聚合酶和逆轉錄酶缺乏校正功能，因此在宿主免疫壓力和抗病毒藥物的選擇壓力下，其核酸在少數(shù)位點上發(fā)生突變是一種常見現(xiàn)象。

HBV對核苷（酸）類似物耐藥的產生與HBV聚合酶基因變異有關，并且HBV聚合酶基因變異是多位點的，以C區(qū)YMDD（酪氨酸－蛋氨酸－天冬氨酸－天冬氨酸）基序的變異最為重要。拉米夫定(LAM)的主要耐藥位點位于C區(qū)（rtM204V/I），204位點的蛋氨酸被纈氨酸（V）或異亮氨酸（I）置換，即rtM204V/I。上述突變直接導致病毒對藥物的敏感性降低，被稱為原發(fā)耐藥突變。另外部分突變不直接引起病毒對藥物敏感性的下降，但可以恢復原發(fā)耐藥變異病毒受損的復制力，被稱為補償耐藥突變，主要有rtV173L、rtL180M(常與rtM204V共同出現(xiàn))和rtL80I(常與rtM204I共同出現(xiàn))。比如，HBV雙點突變株如rtM204V/rtL180M，其病毒復制能力強于rtM204I的單點突變株，可能與rtL180M（B區(qū)）的變異補償C區(qū)YMDD變異株的復制缺陷有關。而另一種代表藥物阿德福韋酯(ADV)，其耐藥變異位點則主要集中于HBV聚合酶基因B區(qū)rtA181T和D區(qū)rtN236T位點。

三、乙型肝炎病毒耐藥基因檢測方法

1.PCR產物直接測序：是將HBV基因組的逆轉錄酶區(qū)進行擴增后直接進行測序分析的方法。PCR產物直接測序法可檢測已知和可能的未知耐藥變異位點，是最常用的基因型耐藥檢測方法之一。PCR產物直接測序的方法一般作為基因型耐藥檢測的金標準。該方法的缺點是靈敏性較差，只有當變異株超過HBV準種池的20%時才能被發(fā)現(xiàn)。

2.聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)：該方法具有較強的靈敏性，可檢測數(shù)量占HBV準種池5%的耐藥變異株。但是PCR-RFLP只能檢測已知、單一位點的變異，對于少數(shù)耐藥變異位點監(jiān)測不失為一種簡便、快速且廉價的方法。但隨著多種核苷（酸）類似物的相繼問世和HBV耐藥變異位點的不斷出現(xiàn)，該方法將難以勝任多位點變異的檢測。

3.反向雜交法：基于該技術的INNO-LiPA方法在國外已獲準應用于臨床檢測，目前INNO-LiPA HBV DR v3 可檢測包括拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、恩替卡韋(ETV)與阿德福韋酯(ADV)常見耐藥位點。該法可檢測變異株占HBV準種池5% ~ 10%的樣品，故敏感性較好，但其同樣只能檢測已知位點變異。

4.實時熒光PCR：該方法操作簡便，可檢測變異發(fā)生率低于10%的耐藥變異。僅能檢測已知位點。

5.基因芯片：亦稱DNA芯片、DNA微陣列，可檢測已知變異位點。

6.限制性片段質譜多態(tài)性技術：該技術是將PCR-RFLP技術與基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜技術結合，靈敏度高，能夠發(fā)現(xiàn)數(shù)量不足HBV準種池1%的變異株，但其同樣僅能檢測已知位點變異，且價格昂貴，很難在臨床推廣應用。

四、目前已上市產品介紹

我國已批準上市的乙型肝炎病毒耐藥基因檢測試劑盒較多采用熒光PCR法，主要為國產產品，針對的基因突變位點主要是204位點的YMDD→YIDD（550ATG→ATT及550ATG→ATC）與YMDD→YVDD（550ATG→GTG）。還有較少產品能夠檢測發(fā)生在180位點（rtL180M）的基因突變。

五、小結

由于肝細胞中的共價環(huán)狀閉合DNA持續(xù)存在，使得乙肝患者需要長期用藥治療。抗HBV核苷（酸）類藥物主要有拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、恩替卡韋(ETV)、阿德福韋酯(ADV)和富馬酸替諾福韋酯(TDF)，其中前4種已在我國上市。長期使用核苷（酸）類似藥物不可避免地導致耐藥基因突變，最終病毒恢復復制能力，病情反彈。盡早進行乙肝病毒耐藥基因突變的檢測，可以及時發(fā)現(xiàn)病毒的耐藥情況，指導醫(yī)生合理用藥。隨著生物檢測技術的發(fā)展，越來越多的突變位點被發(fā)現(xiàn)，為此類產品的技術審評帶來挑戰(zhàn)。

體外診斷試劑與適用儀器的技術審評情況介紹

一、背景介紹

《體外診斷試劑注冊管理辦法》規(guī)定,對于已獲批的試劑增加適用儀器情況，注冊人可以采取申請體外診斷試劑產品許可事項變更的形式進行注冊申報。區(qū)別于注冊申請，對于上述適用于變更的情況，注冊人可以在不改變產品的設計以及技術原理的情況下，進行設計變更的驗證或確認，更加靈活地進行產品的研發(fā)和生產。

二、我國的技術審評情況及發(fā)展趨勢

隨著已獲批體外診斷試劑增加適用儀器的現(xiàn)象層出不窮, 本著科學審評的原則，參考國際先進監(jiān)管經驗，我們也在工作過程中探索新的審評方式。具體的實施路徑是由注冊人具體變更情形，從技術分析和風險管理兩個角度分析并說明變化部分對產品安全性、有效性可能產生的影響。根據(jù)上述分析和考量，自行選擇驗證或者確認變化部分對產品安全性、有效性影響的研究方法，包括分析性能以及臨床性能研究部分，并制定研究方法的選擇依據(jù)以及研究結果的驗收標準。在此基礎上制定研究方案，開展對試劑盒和新增適用儀器組合的研究，詳細記錄研究過程和結果以及得出結論。另外，技術審評鼓勵注冊人盡可能系統(tǒng)全面的分析和論證各類證據(jù)用于支持增加適用儀器的科學合理性。

注冊人可以通過基于產品風險的評估，相應地進行設計變更的驗證與確認，分析并評價新增加的適用儀器對產品說明書聲稱的分析性能和臨床性能的影響。其中分析性能包括對于試劑盒的性能以及試劑盒和儀器組合性能的評估驗證，前者例如準確度、檢測限、精密度、線性或溯源性等，后者例如攜帶或交叉污染、機載試劑和定標液穩(wěn)定性或鉤狀效應等。同時應研究確認對于臨床性能的影響，例如是否改變預期適用人群的參考區(qū)間或者陽性判斷值。另外還包括對臨床適應癥的影響，例如在定性、半定量和定量結果判讀更改，樣本類型的更改或者增加高靈敏度性能的情況下評價診斷靈敏度和特異性、陰陽性符合率和總符合率等關鍵臨床參數(shù)。

根據(jù)上述對于試劑盒和儀器組合進行評估的驗證或確認研究，在結果顯示變更對產品的安全有效性不造成顯著影響，并且不引發(fā)新的風險或者顯著改變現(xiàn)有風險的情況下，注冊人即可以產品許可事項變更的形式進行注冊申報。

這里值得注意的是，在影響醫(yī)療決策制定，也就是顯著改變臨床性能的情況下，基于對產品臨床使用過程中潛在風險的考慮，建議注冊人將變更后的試劑盒按照新產品進行注冊申報。

三、其他國家的監(jiān)管情況

對于類似的情況，美國FDA于2003年發(fā)布了儀器替代家族政策,并于2017年12月進行了更新。適用范圍是已獲批的體外診斷試劑產品增加適用儀器的情況，前提是適用儀器已上市或者與已獲批的設備屬于同一個儀器家族。這里的儀器家族是指具有相同的結構、設計、電氣安全和電磁兼容性能以及功能（如檢測方法、信號范圍和強度以及反應條件）的設備系列；試劑和儀器可以是相同或者不同廠家生產的產品。注冊人應當根據(jù)檢測試劑盒的質量體系要求評估試劑盒和新增適用儀器組合的性能，以確保申報的檢測系統(tǒng)具有可接受的性能。此外，試劑盒的注冊人負責確保經調整或更改的檢測系統(tǒng)能夠持續(xù)滿足設計驗收標準。

對于試劑盒和新增適用儀器組合的性能研究,也就是將已獲批的檢測系統(tǒng)的性能轉移到新的檢測系統(tǒng)后的評價路徑,美國FDA也發(fā)布了相關的技術指南性文件,并建議將研究結果納入PMA（上市前批準）補充文件或新的510（k）（上市前通告）文件。包括定性檢測和定量檢測產品的轉移研究，其中定性檢測應評估產品的診斷靈敏度、精密度以及使用臨床樣本進行比較研究等；定量檢測應評估產品的分析靈敏度、精密度、線性范圍以及使用臨床樣本進行方法學比對研究等。

根據(jù)上述對于試劑盒和儀器組合進行評估的驗證或確認研究，在結果顯示變更對產品的安全有效性不造成顯著影響，并且不引發(fā)新的風險或者顯著改變現(xiàn)有風險的情況下，注冊人即可考慮將檢測試劑盒應用于儀器家族的新成員，并按照質量管理體系的要求進行相應的文件記錄或者提交PMA（上市前批準）補充文件申請。

如果發(fā)生下屬情形之一，美國FDA則要求注冊人提交新的510（k）或者PMA申請。第一種情況是體外診斷試劑的技術原理發(fā)生改變,包括反應原理（如雙抗原夾心法、雜交捕獲法），檢測模式（如化學發(fā)光法、比濁法），測量方法（如終點/速率、定性/定量），信號處理方法，數(shù)據(jù)獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。第二種情況是主要原材料或關鍵反應成分發(fā)生更換,包括抗原-抗體、酶-底物、結合物、信號標記物、固相載體、引物-探針、目標物分離（如核酸提取）組分等。

全面了解艾滋病病毒檢測試劑

相關背景

2019年12月1日是第32個“世界艾滋病日”，我國宣傳活動的主題是“社區(qū)動員同防艾，健康中國我行動”。目前，我國艾滋病防控任務依然艱巨。

艾滋病的診斷原則是以實驗室檢測為依據(jù)，結合臨床表現(xiàn)并參考流行病學資料綜合進行。本文對艾滋病病毒檢測試劑的主要種類及各自的用途特點進行介紹，幫您全面了解艾滋病病毒檢測試劑和檢測方法。

艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodef i ci ency syndr ome，AIDS)，是由人類免疫缺陷病毒（human i mmunodef i c i ency vi r us，HI V）也就是艾滋病病毒感染引起的，以人體CD4+T淋巴細胞減少為特征的進行性免疫功能缺陷，疾病后期可繼發(fā)各種機會性感染、惡性腫瘤和中樞神經系統(tǒng)病變等，病死率較高。

目前，艾滋病是威脅我國公眾健康的重要公共衛(wèi)生問題。據(jù)中國疾病預防控制中心、聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署、世界衛(wèi)生組織聯(lián)合評估，我國新發(fā)感染者每年在8萬例左右，截至2018年底，我國估計存活艾滋病感染者約125萬，全人群感染率約9人/萬人。

HIV檢測試劑根據(jù)檢測目標物的不同大致分為：抗體檢測試劑、抗原檢測試劑、核酸檢測試劑和HIV基因型耐藥檢測試劑。通常人們也會根據(jù)檢測試劑的使用特點、用途、性能等，將其進行歸類，如HIV抗體快速檢測試劑、HIV自測試劑、HIV抗體篩查試劑、HIV抗體診斷試劑、HIV抗體確證試劑等。檢測的樣本類型包括血液、尿液、口腔黏膜滲出液等。

一、HIV檢測試劑分類：

1.發(fā)光類檢測試劑

從HIV感染人體到感染者血清中的HIV抗體、抗原或核酸等感染標志物能被檢測出之前的時期，稱為艾滋病的窗口期。此階段的感染者具有傳染性，但無法被檢測手段識別。隨著檢測手段的迭代更新，艾滋病窗口期被一再縮短。目前市場上的主流艾滋病輔助診斷試劑為第三代發(fā)光類檢測試劑和第四代發(fā)光類檢測試劑。第三代試劑檢測的是HIV-IgG和HIV-IgM抗體，窗口期3周左右；第四代試劑同時檢測HIV抗體和p24抗原，窗口期2周左右。

2.抗體快速檢測試劑

目前已有多家生產商生產的快速檢測試劑獲批上市。此類試劑采用膠體金等免疫層析技術原理，檢測受試者血液、口腔黏膜滲出液等樣本中的HIV抗體。快速檢測試劑一般只需20分鐘即可獲得結果。然而，快速檢測并不等同于早期診斷，并不能更早地發(fā)現(xiàn)HIV感染。相反，基于該檢測方法的局限性，當采用非血液樣本進行檢測時，應謹慎可能出現(xiàn)的假陰性及假陽性結果。

3.自測試劑

擴大檢測（盡可能多地發(fā)現(xiàn)AIDS患者/HIV感染者）是我國預防控制艾滋病的核心策略。由于此疾病的隱匿性，及社會歧視、恥辱感等的存在，高危人群獲得上述醫(yī)學專業(yè)實驗室檢測的覆蓋率仍不足。

今年7月，我國首次批準了可用于消費者自測用途的HIV尿液抗體檢測試劑。與上述其他檢測試劑不同，自測試劑在試劑性能滿足要求的基礎上，其產品設計更易操作，說明書編寫更為通俗，適合無專業(yè)背景的人使用。此類試劑在上市前臨床試驗研究中，對目標用戶在醫(yī)院及家中等可能應用的場景進行自檢試驗，并進行了消費者對說明書、標簽等關鍵信息的調查問卷試驗，確認了無專業(yè)背景消費者使用時檢測結果的可靠性。

4.HIV抗體確證試驗試劑

上述發(fā)光類檢測試劑、抗體快速檢測試劑和抗體自測試劑，都屬于抗體初篩試驗類試劑范疇，但人們無法僅根據(jù)初篩試驗結果給出受試者感染HIV的結論。臨床中，對初篩陽性人群，需采用包括免疫印跡法(WB)，條帶/線性免疫試驗（RIBA/LIA），間接免疫熒光(IFA)等方法進行復檢試驗，此類試劑被稱為HIV抗體確證試驗試劑。

5.HIV核酸檢測試劑

患者感染HIV后，病毒在其體內快速復制，當血液中的病毒RNA高于核酸檢測試劑檢測下限時，HIV核酸檢測結果呈陽性，此時可結合流行病學史、臨床癥狀及HIV抗體初篩結果作出判斷。目前認為HIV核酸檢測的窗口期可縮短至1周左右。

除上述初篩用途外，HIV核酸定量檢測試劑還可用于臨床管理HIV感染的患者。具體來說，可通過測定基線HIV-1RNA水平，對患者的預后進行評價；或在抗病毒治療過程中通過測定患者血液中HIV-1RNA水平的變化來監(jiān)控抗病毒治療的效果。

6.HIV基因型耐藥檢測試劑

HIV耐藥檢測結果可為艾滋病治療方案的制訂和調整提供重要參考。檢測結果為HIV耐藥，表示該感染者體內病毒可能耐藥，同時需密切結合臨床情況，充分考慮HIV感染者的依從性，對藥物的耐受性及藥物代謝吸收等因素進行綜合評判。

二、注意事項

HIV感染的高風險人群包括有男男同性性行為者，靜脈注射毒品者，與HIV/AIDS患者有性接觸者，多性伴人群，懷疑接受過不潔輸血、使用過未經嚴格消毒的針具注射的人等。當以上人群出現(xiàn)發(fā)燒、皮疹、疲勞、頭痛、腹瀉、淋巴結腫大等癥狀，或懷疑自己可能感染HIV時，可到設置于當?shù)丶膊☆A防控制機構或指定醫(yī)療機構的艾滋病自愿咨詢檢測（VCT）門診/室，接受免費且保密的咨詢和檢測，也可自行購買自測抗體檢測試劑，進行自我檢測。

消費者進行自我檢測時應特別注意：由于疾病窗口期的存在、HIV變異或樣本處理不當?shù)纫蛩兀魴z測結果為陰性，并不能排除HIV感染的可能性。如果自我檢測距離最近一次高危行為的時間間隔在窗口期內，建議隔一段時間再自行檢測，或到當?shù)丶膊☆A防控制機構或醫(yī)療機構咨詢檢測。若自我檢測結果呈陽性，也無需過分恐慌，因為自我檢測結果僅為初篩結果，并不能判定檢測者已感染HIV，此時，應向所在地的疾病預防控制機構或醫(yī)療機構進行咨詢，并做進一步檢測來確診HIV感染狀態(tài)。

目前，國家已批準了多個用于HIV感染檢測的試劑，用途覆蓋艾滋病的診斷、病情監(jiān)測和用藥指導。就使用人群來區(qū)分，獲批產品包括實驗室檢測試劑和消費者自測試劑。需注意的是，目前可選擇的所有檢測試劑都有各自的用途和局限性，使用時應根據(jù)用途和行業(yè)技術規(guī)范，確定HIV感染檢測策略。

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）檢測概述

一、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）簡介

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（Microsatellite Instability，MSI），是指由于在DNA復制時插入或缺失突變引起的微衛(wèi)星（Microsatellite, MS）序列長度改變的現(xiàn)象，常由錯配修復功能（Mismatch repair, MMR）缺陷引起。MS序列，是一些短而重復的DNA序列，一般由1～6個核苷酸組成，串聯(lián)重復排列，常見類型為雙堿基CA/GA/GT或單堿基A/T等。MS序列可以位于基因的重要非編碼區(qū)，也可以位于基因的編碼區(qū)，多態(tài)性分布于整個基因組，個體差異大。

MSI現(xiàn)象于1993年被Jacobs等人在結直腸癌中首次發(fā)現(xiàn)。隨著針對MSI的研究深入，發(fā)現(xiàn)MSI現(xiàn)象不止存在于結直腸癌，在子宮內膜癌、胃癌、肝細胞癌、乳腺癌等實體瘤中均有發(fā)生。

二、MSI檢測方法

目前檢測癌細胞中的MSI時，既可以通過檢測MMR基因缺失來確定是否發(fā)生MSI，如依賴于免疫組化技術的蛋白水平檢測，也可以直接檢測MSI的序列變化，如PCR（聚合酶鏈反應）檢測等的分子水平檢測。

（一）免疫組化方法（Immunohistochemistry, IHC）

常見的方法為采用免疫組織化學方法檢測腫瘤組織中錯配修復基因MLH1、MSH2、MSH6及PMS2的表達。任何一項錯配修復基因表達缺失，被定義為MSI，否則即為微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）。其中一個表達缺失則稱為低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI-L)，2種或2種以上蛋白表達缺失為高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI-H)。

此方法檢測MSI相對較簡單，成本較低。但存在一些問題，如使用抗體的不一致、病理醫(yī)生的閱片標準不一致等。

（二）分子水平的檢測

1.聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR)技術

目前主要采用多重熒光PCR結合毛細管電泳的方法。通過PCR方法檢測特異的微衛(wèi)星重復序列擴增判定MSI狀態(tài)，比較腫瘤患者的標本組織與正常組織的位點突變情況。其比較的位點為美國國家癌癥研究所（NCI）推薦的5個微衛(wèi)星位點：BAT25、BAT26、D5S346、D2S123及D17S250。其中≥2個位點發(fā)生改變判定為高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-H），僅1個位點發(fā)生改變判定為低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-L），無位點改變判定為微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）。有研究認為，二核苷酸重復序列的特異性和靈敏度比單核苷酸重復序列要低，因此關于最適合MSI檢測的位點仍存在爭議。Bacher等對266個微衛(wèi)星位點(其中包括單核苷酸、二核苷酸、四核苷酸以及五核苷酸微衛(wèi)星位點)檢測的敏感性及準確性進行評估，提出了Promega分析系統(tǒng)，該系統(tǒng)使用五個單核苷酸微衛(wèi)星位點(BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24和MONO-27)及兩個五核苷酸微衛(wèi)星位點(Penta C和Penta D)檢測MSI。

大量的實驗證實，MMR免疫組化檢測結果與MS的PCR檢測結果有高度關聯(lián)性，靈敏度92%，特異性可達100%。

該方法目前是檢測MSI的方法學“金標準”，但操作過程復雜，花費較高，且在結果判斷中會碰到以下問題，如熒光的過強或過少、非特異性峰、不顯著的峰大小改變，雜合性缺失等。

2.新一代測序方法（Next Generation Sequencing, NGS）

NGS又稱為第二代測序技術，是一種高通量測序技術，能一次性對幾十萬到幾百萬條基因分子進行序列測定。目前NGS方法已經成為檢測MSI的新工具，其最大優(yōu)勢是可以實現(xiàn)多位點高通量檢測。紀念斯隆·凱特琳癌癥研究中心（Memorial Sloan Kettering Cancer Center，MSK）的一項研究使用NGS方法對12,288例實體瘤病人進行檢測，判定MSI狀態(tài)，并用MSI-PCR/MMR-IHC進行了驗證。實驗證明, NGS方法較MSI-PCR方法具有更高的敏感性。

三、MSI檢測的臨床意義

目前，有關MSI檢測的臨床意義有如下觀點：

（一）Lynch綜合征的篩查

Lynch綜合征，亦稱遺傳非息肉病性結直腸癌（HNPCC），是一種呈家族遺傳傾向的常染色體顯性遺傳病，由于MMR基因發(fā)生胚系突變所致，約占所有結直腸癌（Colorectal carcinoma, CRC）3%～5%。Lynch綜合征最突出的特點之一是攜帶者本人或家族成員可發(fā)生CRC及其他多種Lynch相關腫瘤。MSI是Lynch綜合征的特征性分子，約90%以上表現(xiàn)出MSI。同時并不是所有的MSI均是Lynch綜合征，在散發(fā)性CRC中也存在10%～15%的MSI。

（二）MSI與結直腸癌的預后

臨床研究證實，MSI與結直腸癌的預后有著密切的關系。MSI-H結直腸癌患者相比MSS患者具有顯著的生存優(yōu)勢，臨床表現(xiàn)較差，但預后更好。研究證實，針對Ⅱ/Ⅲ期結直腸癌患者，MSI-H患者的總生存期及無病生存期明顯延長。美國國家綜合癌癥網絡（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）發(fā)布的結直腸癌指南，建議MSI檢測應在所有結直腸癌史的病人中進行。

（三）MSI與指導用藥

研究證實，MSI-H的結直腸癌Ⅱ期患者不能在氟尿嘧啶（5-FU）治療中獲益。同時因MSI-H的晚期結直腸癌患者通常具有PD-1及PDL-1等的高表達，可通過對PD-1/PD-L1的靶向抑制，促使機體免疫系統(tǒng)攻擊和殺滅腫瘤細胞。目前美國FDA已批準PD-1免疫治療單抗pembrolizumab、ipilimumab和nivolumab用于具有錯配修復缺陷（dMMR）/MSI-H表型的轉移性結直腸癌（mCRC）的末線治療。除了mCRC的治療外，2017年5月，美國FDA批準了PD-1抗體pembrolizumab用于治療成人和兒童具有dMMR/MSI-H表型的沒有其他治療選擇的，不可切除或轉移性實體瘤患者。

《中國結直腸癌診療指南》（2010版）就明確了“Ⅱ期結直腸癌，有條件者建議檢測組織標本MMR或MSI，如為dMMR或MSI-H，不推薦氟尿嘧啶類藥物的單藥輔助化療”。在《中國結直腸癌診療指南》（2017版）的組織病理學檢查部分，增加了MMR或MSI的檢測作為復發(fā)或轉移性結直腸癌的推薦檢測方法，“確定為復發(fā)或轉移性結直腸癌時，推薦檢測腫瘤組織K-ras及N-ras基因、BRAF基因、錯配修復蛋白表達或微衛(wèi)星狀態(tài)及其他相關基因狀態(tài)以指導進一步治療。”

四、相關檢測產品介紹

目前國際上已上市的產品有：

（一）MSI-IVD Kit (FALCO)

日本FALCO公司的MSI-IVD Kit已獲得日本厚生勞動省的批準上市。該試劑盒采用PCR技術檢測癌組織中提取的基因組DNA中的MSI狀態(tài)，檢測7個微衛(wèi)星位點（五個單核苷酸微衛(wèi)星位點BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24和MONO-27及兩個五核苷酸微衛(wèi)星位點Penta C和Penta D）。該產品由日本FALCO公司與Promega公司合作開發(fā)，作為伴隨診斷試劑，用于指導PD-1抗體pembrolizumab在局部晚期或轉移性癌癥患者中的應用。

（二）VENTANA MMR IHC panel

該產品采用IHC方法檢測經福爾馬林固定石蠟包埋的結直腸癌組織切片中的四種MMR蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2，及BRAF V600E

突變蛋白。用于Lynch綜合征的輔助診斷，同時檢測BRAF V600E突變蛋白用于散發(fā)性CRC及Lynch綜合征的輔助鑒別診斷。此產品通過De Novo途徑在美國上市。

（三）MSK-IMPACTTM

2017年11月16日，美國FDA批準紀念斯隆·凱特琳癌癥研究中心（Memorial Sloan Kettering Cancer Center，簡稱MSK）基于二代測序技術的癌癥基因檢測分析平臺MSK-IMPACTTM。該產品能夠一次對病人腫瘤468個基因的突變進行檢測，并且可以檢測MSI基因組特征。該產品僅限于在MSK中進行使用，其檢測結果不與任何藥物聯(lián)用。該產品的MSI的檢測性能通過對10,900名患有66種不同類型晚期實體瘤患者的研究進行確定。

（四）FoundationOne CDx (F1CDx)

2017年11月30日，美國FDA批準了Foundation Medicine公司針對多種實體瘤的二代測序的體外檢測產品—FoundationOne CDx（F1CDx）。該產品僅允許在Foundation Medicine公司進行檢測。這款產品除了可檢測5種腫瘤中的324個基因的突變，還可以檢測MSI和腫瘤突變負荷（TMB）兩個基因組特征，是FDA批準的首款獲得突破性認定的癌癥NGS體外診斷檢測產品。

五、總結

隨著研究的進一步深入，MSI在腫瘤的發(fā)生機制中所起的作用越來越被人們所關注。雖然近年來MSI的檢測在臨床應用方面被日趨關注，但是國內還未有注冊獲批的產品。2018年已有MSI檢測試劑盒通過國家藥品監(jiān)督管理局的創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審查程序，該產品采用熒光PCR-毛細管電泳法。

如何判定一個體外診斷試劑是否屬于防治罕見病相關產品

體外診斷試劑產品是否屬于防治罕見病相關產品，應依據(jù)《罕見病防治醫(yī)療器械注冊審查指導原則》（2018年第101號）、《關于公布第一批罕見病目錄的通知》（國衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2018〕10號）及《國家衛(wèi)生健康委辦公廳關于印發(fā)罕見病診療指南（2019年版）的通知》（國衛(wèi)辦醫(yī)函〔2019〕198號）等文件判定。如申報產品臨床適用癥為第一批罕見病目錄中的疾病，且依據(jù)罕見病診療指南（2019年版），該疾病的診療流程中需進行申報產品對應的檢測項目的檢測，則該產品可認定為防治罕見病相關產品。對于申報產品檢測項目為新研發(fā)的生物標志物，應明確產品預期用途及其與相關罕見病診療的關系,從而判定其是否屬于防治罕見病的產品

血氣檢測類產品適用的樣本類型是什么

臨床應用中，血氣檢測類產品（包括儀器和試劑）的樣本類型一般為動脈全血。審評過程中依據(jù)注冊申報資料的驗證內容，一般將適用樣本類型明確為動脈全血。如果產品適用于檢測靜脈全血、毛細血管全血等其他樣本類型，亦應進行充分驗證。

體外診斷試劑的配套質控品有何要求

體外診斷試劑的配套質控品用于對檢測系統(tǒng)進行質量控制。申請人應對申報試劑檢測質控品的預期結果（靶值和靶值范圍）進行驗證，并將經驗證的配套質控品在試劑說明書中予以明確。未經驗證的“第三方質控品”、“其他商用質控品”等表述不應出現(xiàn)在產品說明書中。

體外診斷試劑臨床試驗中，能否采用境外已上市同類產品作為對比試劑

體外診斷試劑的臨床試驗一般采用試驗用體外診斷試劑與臨床參考標準和/或已上市同類產品進行比較研究的方法，評價試驗用體外診斷試劑的臨床性能，為該產品安全、有效性的確認提供科學有效的臨床證據(jù)。其中，“已上市同類產品”指的是境內批準上市的同類產品。

對于目前臨床上沒有可參照的臨床參考標準或現(xiàn)有臨床參考標準不能全面評價產品臨床性能的情況，臨床試驗設計時，在確認被測物臨床檢測意義的前提下，還應依據(jù)現(xiàn)有臨床實踐和理論基礎選擇適當?shù)膶嶒炇曳椒ㄟM行檢測性能評價，例如：與臨床公認的、標準化的實驗室參考方法進行對比試驗。如果有境外已批準上市的同類產品，與試驗用體外診斷試劑具有相同的預期用途，且該產品經過了充分的性能驗證和確認，實驗室檢測過程中可實現(xiàn)良好的質量控制，并被臨床廣泛認可能夠用于相關標志物檢測，則該產品亦可作為實驗室檢測方法用作對比方法。

eRPS系統(tǒng)注冊申報申請表中IVD產品分類編碼應如何選擇

按照《關于實施醫(yī)療器械注冊電子申報的公告》（2019年第46號）的要求，自2019年6月24日，正式啟用eRPS系統(tǒng)。eRPS系統(tǒng)中，體外診斷試劑申請表分類編碼一欄除固定6840外,增加了對6840細化的產品類別名稱,申請人/注冊人可在下拉菜單中選擇。以下就該細化的分類編碼的選擇逐一說明：

1、23-001：與中華人民共和國傳染病防治法所述疾病相關的病原體檢測試劑；

此類產品僅包括《中華人民共和國傳染病防治法》中所規(guī)定的甲類、乙類和丙類傳染病相關的病原體檢測試劑。

2、23-002：除23-001外其它致病性病原體抗原、抗體以及核酸等相關的檢測試劑；

本類產品包括除《中華人民共和國傳染病防治法》中所規(guī)定的甲類、乙類和丙類傳染病以外的其他致病性病原體相關的檢測試劑，如幽門螺桿菌、沙眼衣原體、白色念珠菌、人乳頭瘤病毒、EB病毒、單純皰疹病毒等。

3、23-003：與血型、組織配型相關的檢測試劑；

本類產品指ABO、Rh等血型檢測試劑、血小板抗體、抗人球蛋白、紅細胞抗體檢測試劑以及HLA-DNA分型檢測試劑等。

4、23-004：與人類基因、遺傳性疾病相關的檢測試劑；

如染色體非整倍體(DNA)、CYP2C19基因等人類基因相關的檢測試劑以及遺傳性耳聾基因檢測、苯丙氨酸檢測等遺傳性疾病相關的檢測試劑。

5、23-005：與免疫組化、原位雜交、流式細胞分析儀配套相關檢測試劑；

指采用免疫組化、原位雜交、流式技術的相關檢測試劑，且依據(jù)《總局關于過敏原類、流式細胞儀配套用、免疫組化和原位雜交類體外診斷試劑產品屬性及類別調整的通告》（2017年第226號）按照第二類和第三類體外診斷試劑管理的產品；

6、23-006：除列入免臨床目錄的腫瘤標志物以外的其它與腫瘤相關的檢測試劑；

本類產品是指除列入免臨床目錄的腫瘤標志物以外的其他腫瘤相關檢測試劑，如甲基化檢測等。

7、23-007：列入免臨床目錄的腫瘤標志物相關的檢測試劑；

本類產品僅包括已列入免臨床目錄的腫瘤標志物相關的檢測試劑，如甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）等。

8、 24-001：用于蛋白質檢測的試劑；

　　24-002：用于糖類檢測的試劑；

　　24-003：用于激素檢測的試劑；

　　24-004：用于酶類檢測的試劑；

　　24-005：用于酯類檢測的試劑；

　　24-006：用于維生素檢測的試劑；

　　24-007：用于無機離子檢測的試劑；

　　24-008：用于藥物及藥物代謝物檢測的試劑；

　　24-009：用于自身抗體檢測的試劑；

　　24-010：用于變態(tài)反應（過敏原）檢測的試劑；

　　24-011：與麻醉藥品、精神藥品、醫(yī)療用毒性藥品檢測相關的試劑；

　　24-012：用于其他生理、生化或者免疫功能指標檢測的試劑；

　　24-013：用于微生物鑒別或者藥敏試驗的試劑；

自24-001至24-013，與《6840體外診斷試劑分類子目錄》（2013版）一致。

以上細分的IVD分類編碼對于申報資料提交至eRPS系統(tǒng)后能否進入正確的分配路徑至關重要，申請人/注冊人應重視并正確進行選擇，如出現(xiàn)選擇錯誤的情況，請于立卷審查環(huán)節(jié)發(fā)補后進行更正。

體外診斷試劑產品技術要求附錄中主要原材料的供應商該如何填寫

體外診斷試劑產品技術要求附錄中要求標注主要原材料的來源,如為外購應寫明供應商。此處的供應商應為原材料的生產商,而不是經銷商或代理商。相應的，注冊變更情形中主要原材料的供應商的變更是指原材料的生產商發(fā)生變化的情形。

體外診斷試劑臨床試驗中如采用核酸序列測定、GC-MS/MS等實驗室檢測參考方法作為對比方法進行比較研究,是否可以委托測試

對于某些目前臨床上尚不存在明確的臨床診斷“金標準”，亦無可比的同類產品上市的體外診斷試劑，臨床試驗研究者應依據(jù)現(xiàn)有臨床實踐和理論基礎，建立合理的方法，進行比較研究。對于部分體外診斷試劑，臨床試驗中采用核酸序列測定、GC-MS/MS等實驗室檢測參考方法作為對比方法進行比較研究，這些方法非臨床常規(guī)檢測技術，需要專門的設備儀器和試驗條件，且臨床試驗機構可能不具備相關檢測條件。對于此類情況，申請人應盡可能選擇具備相應條件的臨床試驗機構開展臨床試驗，確無檢測條件的部分臨床試驗機構可將此部分測試委托給專門的測序機構、具備一定檢測資質的實驗室進行檢測，并對檢測結果進行認可。應提交臨床試驗機構與受委托機構的委托證明文件，并評價對比方法的方法學研究和整體質量。不得委托申請人的實驗室進行相關測試。

新研制試劑的配套專用儀器尚未取得注冊證，是否可以申請試劑注冊

對于新研制體外診斷試劑及其配套專用儀器，由于分屬不同的法規(guī)管理，因此需分別提交注冊申請。但試劑及其專用儀器檢測性能的驗證和確認是密不可分的整體驗證過程，因此，在試劑和儀器均已定型的情況下，并不限定試劑和其配套專用儀器的上市順序。但試劑注冊申請時，應能夠確保配套儀器及檢測系統(tǒng)定型，如使用非本企業(yè)生產的儀器，則所使用配套儀器應已作為醫(yī)療器械在中國境內上市，并能夠對其在配套儀器上的性能進行全面驗證和確認。

體外診斷試劑臨床試驗中能否使用凍存樣本

體外診斷試劑產品臨床試驗中需使用符合入組標準的病例樣本進行試驗，在具體樣本入組時除注意病例的選擇外（此部分內容見共性問題“關于體外診斷試劑臨床試驗入組病例樣本的常見問題”），還應注意樣本的保存條件。原則上，臨床試驗樣本的使用應最大可能與試劑臨床使用過程中樣本的狀態(tài)一致，如臨床使用狀態(tài)為新鮮采集后檢測，則應考慮使用新鮮采集的樣本進行臨床試驗。如臨床使用過程中可能存在樣本保存過程（如一定條件下凍存），且說明書中樣本保存條件明確了相應的樣本保存條件及有效期，則臨床試驗中亦可納入部分相應保存條件下的樣本。無論使用新鮮采集樣本還是凍存樣本，均應確保入組樣本的保存條件和期限符合相應產品樣本保存的要求。

體外診斷試劑產品說明書“標識的解釋”項涉及修改如何執(zhí)行

按照《總局辦公廳關于體外診斷試劑說明書文字性變更有關問題的通知》（食藥監(jiān)辦械管[2016]117號），體外診斷試劑說明書信息性內容的文字性變化可由注冊人自行修改，其中包括體外診斷試劑說明書“標識的解釋”項目，因注冊人按照YY/T0466系列標準完善體外診斷試劑說明書中相應標識的解釋內容，導致該項內容變化，但不涉及其他需辦理許可事項變更的情況，注冊人應自行修改。此處YY/T0466系列標準可為YY/T0466系列標準或其對應的ISO 15223標準。如注冊人自行修改，應在延續(xù)注冊時予以說明。